Исследование крови на сифилис РПГА методом проводится пациентам для подтверждения инфицирования бледными трепонемами и определения стадии болезни. Прямая реакция пассивной гемагглютинации является одним из самых достоверных методик и относится к специфическим тестам. Чувствительность РПГА достигает 98-100% при соблюдении определенных условий. При выдаче направления на анализ врач должен уведомить пациента о необходимости соблюдения правил. Невыполнение рекомендаций может привести к получению ложных результатов.
Общая характеристика РПГА
РПГА-тест связан с феноменом агглютинации эритроцитов, поверхность которых адсорбирует антиген бледной трепонемы в момент добавления к нему крови сифилитического больного. Организм начинает синтезировать антитела класса М спустя 14 суток после внедрения спирохеты. Иммуноглобулины класса G возникают в крови инфицированного через месяц. В некоторых случаях время образования антител удлиняется до 45 дней, поэтому РПГА-метод при первоначальной форме венерического заболевания менее чувствителен по сравнению с исследованием, осуществляемом на втором и третьем этапах сифилиса.
Тест, в котором применяется гемагглютинация, характеризуется высокой специфичностью (до 98%), что позволяет применять пассивный метод для подтверждения диагноза после использования неспецифического анализа. Степень чувствительности РПГА во вторичной, третичной фазе, а также при скрытой форме сифилиса достигает 100%. Достоверность этого и других трепонемных методик гораздо выше по сравнению с тестом, основанном на микрореакции преципиации, поэтому в настоящее время в лабораториях чаще применяются специфические способы при скрининговых исследованиях.
Часто результаты РПГА-метода остаются положительными даже после завершения терапии инфекционного заболевания. Лишь при проведении лечения на первоначальной стадии анализ становится отрицательным. Тест-система не позволяет дифференцировать раннюю и позднюю форму сифилиса, поскольку положительный результат сохраняется на всю жизнь. Также с помощью РПГА невозможно оценивать степень эффективности терапии.
Исследование с использованием реакции пассивной гемагглютинации рекомендуется пройти не только при наличии признаков инфицирования бледными трепонемами, но и при подготовке к беременности.
Выявление сифилиса на ранней стадии позволяет избежать развития врожденных дефектов у плода и раннего родовспоможения. Анализ может назначаться во время подготовки пациента к плановой операции, а также при желании стать донорами крови.
Методика проведения
В условиях лаборатории к реагентам РПГА специалисты добавляют сыворотку инфицированного человека, что приводит к агглютинации эритроцитов и выпадению их в осадок. Степень склеивания связана с концентрацией белковых образований в крови, поэтому серодиагностика, проводимая этим методом, выявляет не только наличие антител, но и определяет их число.
Результаты исследования представляются в виде титров. При получении положительного анализа можно говорить о наличии в организме пациента бледной трепонемы. В некоторых случаях возможно получение ложноположительной реакции. Значительное завышение показателей означает, что у больного вторичный или скрытый сифилис.
Как подготовиться к сдаче анализа
Для того чтобы тест-система показала верные результаты, пациенту необходимо тщательно подготовится к исследованию:
- Последний прием пищи должен быть не позже 20 часов вечера. Накануне сдачи крови желательно употреблять продукты с минимальным количеством жиров. Тяжелая пища может способствовать получению ложноположительного или ложноотрицательного результатов. В этом случае пациенту придется пересдавать кровь на повторное исследование.
- Забор крови проводится утром, поскольку многим пациентам сложно обойтись без пищи длительное время.
- Перед посещением лаборатории запрещается курить, пить кофе и чаи. Вещество, содержащееся в табачном дыме и попавшее в кровь, может привести к получению ложноположительного или отрицательного результатов.
- Врачи не рекомендуют непосредственно перед сдачей анализов физически перегружать организм. Запрещено заниматься силовыми тренировками, избегать стрессовых ситуаций.
- За несколько дней до процедуры забора крови необходимо полностью отказаться от алкогольных напитков. Спирт может привести к искажению результатов и получению неверных значений.
- Перед сдачей анализов допускается выпить небольшое количество чистой питьевой воды без содержания газов.
Как сдают материал на исследование?
Анализ на сифилис РПГА может проводиться с применением венозной, капиллярной крови, а также спинномозговой жидкости (ликвора), забираемой при подозрении на поражение бледными трепонемами нервной системы (нейросифилис).
Во многих лабораториях для проведения теста используют венозную кровь.
Она набирается в чистые сухие пробирки или вакутайнеры без использования веществ-антикоагулянтов. Биоматериал помещается в термостат на час (T=37), после чего переносится на 60-90 минут в холодное место. Центрифугирование получившегося сгустка совершается в течение ¼ часа при 1000 оборотах в минуту.
После расслаивания образца жидкая часть быстро забирается на исследование, поскольку может наступить распад антител. При необходимости плазма может храниться 5 дней в холодном месте (2-8С). Сильная заморозка допускается только однократно. Хранение такого материала возможно не более 1,5 месяцев. Исследование ликвора проводится в краткие сроки. Перед анализом спинномозговая жидкость не подготавливается.
В стандартных тест-системах (Эколаб) применяются следующие наборы:
- пробирка с эритроцитами с содержащимися на поверхностной части антигенами патогенного возбудителя;
- флакон, в котором находятся чистые кровяные тельца;
- емкость с буферным раствором для разведения крови больного;
- сыворотка инфицированного человека, применяемая для контроля;
- сыворотка здорового пациента для сравнительного анализа;
- пластмассовый планшет, имеющий нумерованные лунки для перемешивания образцов и определения результата.
Набор для проведения исследования содержит определенное число реактивов.
Расшифровка результатов — нормы и отклонения
Сифилитический РПГА-метод предоставляет два вида показателей:
- Качественный. Отвечает за наличие в сыворотке белковых телец, появление которых вызвано внедрением в организм патогенного возбудителя.
- Количественный. Помогает оценивать степень интенсивности продукции антител и определять характер активности бледной трепонемы.
В первую очередь лаборанты выявляют качественный результат. При обнаружении иммуноглобулинов устанавливается их число.
Анализ может показывать:
- 4+ результаты положительные;
- 3+ положительные;
- 2+ слабоположительные;
- 1+ результат сомнителен;
- инфицирования нет.
При получении сомнительного результата рекомендуется провести повторное исследование через 14 дней после первого анализа.
Для первичной формы сифилиса характерны сниженные показатели (менее 1:320). При вторичном венерическом заболевании выявляются повышенные значения титров (более 1:320). При скрытом течении инфекции показатели также занижены.
Отрицательный РПГА-тест означает, что пациент не инфицирован бледными трепонемами либо заболевание находится в инкубационном периоде, который составляет 7-14 дней. В некоторых случаях такой результат получается из-за ошибки лаборанта при взятии биологического материала для проведения исследования.
Причиной получения ложноположительного результата становятся:
- Беременность.
- Аутоиммунные процессы.
- Гепатиты.
- Бактериальные эндокардиты.
- Состояния после вакцинаций.
Исследования с применением РПГА-метода не позволяют проводить дифференциацию сифилиса и других трепонематозов, ранней и поздней формы венерического заболевания. Результаты необходимо оценивать в совокупности с другими показателями, полученными с использованием лабораторных, инструментальных методов.
Цена вопроса
Стоимость исследования крови с применением реакции пассивной гемагглютинации составляет в среднем 5,6$. При этом в частных лабораторных центрах за взятия венозной крови для проведения анализа берется 2,8$. В государственных клиниках исследование проводится бесплатно по направлению врача-венеролога.
Где сдать анализ
Услуги по осуществлению анализов с помощью РПГА-тестов предлагают разные диагностические центры.
В лабораторной службе Хеликс результаты можно получить через 2 дня после сдачи биологического материала. Инвитро предлагает свои услуги по исследованию крови на сифилис методом РПГА. Срок исполнения в этом центре — 1 рабочий день. В медицинской лаборатории Гемотест также можно сдать кровь на анализ с применением РПГА. Результаты выдаются через сутки после забора биологического материала.
Метод РПГА является высокоточным и позволяет определить наличие трепонемной инфекции на любом этапе венерического заболевания. Анализы назначаются для подтверждения заражения пациента, ранее обследованного с помощью неспецифических тестов.
Результаты могут быть ложными при определенных заболеваниях, связанных с аутоиммунными процессами, поражением печени, сердечной мышцы.
При получении сомнительного анализа врачи рекомендуют пройти повторное исследование через 2 недели.